Hb test: mengukur kadar hemoglobin dalam darah, bisa dilakukan di hematology analyzer atau alat khususnya sendiri.
Hb electrophoresis: menganalisis berbagai jenis hemoglobin dalam darah, bisa dilakukan menggunakan electrophoresis chamber.
Hematology Analyzer
Definisi : adalah alat laboratorium yang digunakan untuk mengukur dan menghitung jumlah sel darah. Selain itu, pada teknologi terbarunya, alat ini dapat digunakan untuk mengklasifikasikan leukosit dan mengukur kadar hemoglobin
Prinsip kerja:
- Prinsip penghitungan darah
-
- Electrical resistance : Sel darah merupakan konduktor lemah. Ketika suspensi sel darah yang diencerkan dengan larutan elektrolit isotonik dilewatkan melalui pori kecil dengan arus stabil di kedua sisi, resistansi di zona induksi pori meningkat karena sifat konduktif sel yang lebih rendah dibandingkan dengan larutan elektrolit, menyebabkan perubahan tegangan untuk menghasilkan “pulse”. Data jumlah sel bisa didapatkan dari analisis ukuran ”pulse”
-
- Flow cytometry and light scattering blood cell : Sel-sel individual dibiaskan, difraksi, dan dihamburkan saat sheath fluid dengan agregasi daya fluida melewati area deteksi radiasi laser, dan cahaya yang tersebar diterima oleh detektor cahaya. proses ini akan menghasilkan “pulse”, yang ukurannya sebanding dengan ukuran sel yang diterangi, dan jumlah “pulse” mewakili jumlah sel.
- Prinsip pengklasifikasian WBC
-
- Leucocyte trichotomy : Ketika volume leukosit yang berbeda berjalan melalui pori-pori kecil, ada perbedaan substansial dalam ukuran “pulse” yang dibuat, sesuai dengan prinsip hambatan listrik. Instrumen ini membagi leukosit menjadi tiga kelompok berdasarkan ukuran denyut nadi.
-
-
- kelompok sel kecil (35-90fl, terutama limfosit),
- kelompok sel menengah (91-160fl, termasuk monosit, eosinofil, basofil, dan sel naif),
- kelompok sel besar (161-450fl, terutama neutrofil)
-
-
- Pentad classification : Penggabungan antara teknik laser, frekuensi radio, dan pewarnaan kimia untuk deteksi simultan sel tunggal dan analisis komprehensif data eksperimen untuk menghasilkan klasifikasi pentad leukosit. Metode ini secara akurat mengklasifikasikan sejumlah besar sel dengan spesifisitas yang tinggi, dan saat ini secara luas dianggap sebagai metode klasifikasi sel darah otomatis yang disukai.
- Prinsip penghitungan hemoglobin : Pada alat ini, hemoglobin biasanya diukur secara spektrofotometri. Dalam pengenceran yang mengandung agen hemolitik, sel darah merah melisiskan dan melepaskan hemoglobin, yang bereaksi dengan komponen tertentu dari agen hemolitik untuk menghasilkan turunan hemoglobin stabil yang kolorimetri dalam rentang gelombang cahaya tertentu (530-550 nm). Karena perubahan absorbansi sebanding dengan konsentrasi hemoglobin darah, konsentrasi hemoglobin dapat dihitung.
Hemoglobin Electrophoresis
Hemoglobin elektroforesis merupakan prosedur pemisahan berbagai jenis hemoglobin yang menggunakan prinsip gel electrophoresis dalam prosedurnya, biasa digunakan untuk memeriksa ada atau tidaknya abnormalitas hemoglobin.
Gel elektroforesis → metode pemisahan yang mengandalkan migrasi dari molekul-molekul sampel yang bermuatan akibat adanya pengaruh dari medan listrik dalam sebuah medium. Hemoglobin yang bermuatan positif akan bermigrasi ke arah elektroda negatif (katoda) untuk kemudian dibiarkan bermigrasi menuju anoda. Berbagai jenis hemoglobin memiliki besar muatan yang berbeda yang mempengaruhi kecepatannya bermigrasi. Oleh karena itu, molekul-molekul hemoglobin ini akan terpisah dan membentuk beberapa hemoglobin bands.
Dikutip dari: